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Tris緩沖體系產(chǎn)品您了解多少?
Tris緩沖液各系列所使用原料為進(jìn)口試劑。Tris(三羥甲基氨基甲烷)為弱堿,分子式為C4H11NO3,相對(duì)分子量為121.14, 在25℃下pKa為8.1。Tris緩沖液的有效緩沖范圍在pH7.0~9.2之間,Tris堿的水溶液pH在10.5左右,其常用作生物緩沖液,緩沖液常用pH值為6.8、7.4、8.0、8.8,其pH值隨溫度變化很大。一般來(lái)說(shuō),溫度每升高1℃,pH值下降0.03。Tris常用來(lái)作為各種緩沖液的基礎(chǔ)成分,調(diào)節(jié)酸堿度,例如配制Tris-EDTA溶液,TBE電泳緩沖液,甘氨酸緩沖液、抗原修復(fù)液等,在分子生物學(xué),免疫學(xué)中廣泛使用。
使用說(shuō)明:
1、1×緩沖液類產(chǎn)品一般無(wú)需稀釋,可直接使用。
2、5×、10×、20×等高濃度溶液需用蒸餾水或去離子水稀釋至1×再使用。
本生詳解常用產(chǎn)品:
(1)Tris-EDTA緩沖液簡(jiǎn)稱TE,即Tris-EDTA buffer(10mM Tris,1mM EDTA pH8.0),用于溶解DNA、保存DNA等,是常用分子生物學(xué)試劑。其主要原理是EDTA可以螯合金屬離。本產(chǎn)主要由Tris、EDTA組成,用DEPC處理后,高壓滅菌,主要用于核酸的溶解等分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)。
(2)Tris-MOPS電泳緩沖液(10×)主要由 tris、MOPS、EDTA、SDS 組成,主要用于 bis-tris 凝膠的電泳緩沖液。適合分離 14-200kd 的蛋白。
(3)Tris-Tricine 陰緩沖液(10×)由 Tris、Tricine、SDS 等組成,用于 Tris-Tricine 緩沖液系統(tǒng)分離 SDS 和多肽。
(4)Tris-Tricine 陽(yáng)緩沖液(10×)由 1M Tris等組成,不含變性劑SDS,用于 Tris-Tricine 緩沖液系統(tǒng)分離 SDS 和多肽。
(5)Tris-EDTA抗原修復(fù)液(1×,pH9.0)可以有效去除醛類固定試劑導(dǎo)致的蛋白之間的交聯(lián),充分暴露石蠟切片等樣品中的抗原表位,可以用于石蠟切片、冰凍切片等樣品使用多聚甲醛、甲醛或其它醛類試劑固定后的抗原修復(fù)。抗原修復(fù)可以提高石蠟切片的免疫染色效果,亦可以不同程度的提高冰凍切片的染色效果。當(dāng)冰凍切片免疫染色效果不理想時(shí),可考慮進(jìn)行抗原修復(fù)。
(6)Tris-甘氨酸電泳緩沖液是用于蛋白變性聚丙烯酰胺凝膠電泳 實(shí)驗(yàn)(SDS-PAGE)中的緩沖試劑。其中粉劑試劑電泳緩沖液預(yù)混粉劑,便于儲(chǔ)存、操作簡(jiǎn)便。其中5×Tris-甘氨酸電泳緩沖液成分為:125mM Tris, 1.25 M Glycine, 0.5%(W/V)SDS。
(7)本生供應(yīng)TAE緩沖液預(yù)混干粉,精選原料,經(jīng)過(guò)特殊加工處理,呈白色粉末狀,溶解性好,使用起來(lái)方便快捷。可迅速配制成1×TAE:含40mM Tris-Acetic Acid,1mM EDTA,pH8.2±0.2。
(8)TBE 緩沖液是生物學(xué)中常使用的核酸電泳緩沖鹽溶液,主要用于DNA的瓊脂糖凝膠電泳。TBE 的主要成分是Tris-硼酸鹽與 EDTA,緩沖能力強(qiáng),適合較長(zhǎng)時(shí)間電泳,分辨率較高,電泳小于1kb的片段時(shí)分離效果好。
(9)TBST 緩沖液是生物學(xué)中常使用的等滲緩沖鹽溶液,主要用于Western Blot實(shí)驗(yàn)中洗去膜上非特異性結(jié)合的抗體等試劑,是常用分子生物學(xué)試劑。由Tris-HCl構(gòu)成穩(wěn)定的PH緩沖體系,NaCl提供等滲條件,Tween-20作為去污劑可增加緩沖液的洗脫能力。
(10)TBS 緩沖液是生物學(xué)中常使用的等滲緩沖鹽溶液,主要用于免疫組化和原位雜交,酶聯(lián)免疫等實(shí)驗(yàn)中,清洗免疫印跡實(shí)驗(yàn)中非特異性結(jié)合的抗體等。由 Tris-HCl 構(gòu)成穩(wěn)定的PH緩沖體系,NaCl 提供等滲條件。
(11)平衡鹽溶液(Balanced Salt Solution,BSS)與細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)下的pH值、滲透壓等環(huán)境狀態(tài)一致,具有維持滲透壓、控制酸堿平衡、供給細(xì)胞生存代謝所必需的能量和無(wú)機(jī)鹽成分等作用,可滿足體外實(shí)驗(yàn)中細(xì)胞生存并維持一定的代謝的基本需要。Tris-BSA溶液(0.02mol/L,pH7.0)主要由0.02mol/L Tris、0.1%BSA組成, pH值為7.0,常用于細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程中細(xì)胞的洗滌或其他常規(guī)用途。
(12)Tris緩沖液的有效緩沖范圍在pH7.0~9.2之間,用來(lái)作為各種緩沖液的基礎(chǔ)成分,調(diào)節(jié)酸堿度。Tris-Triton-NaCl緩沖液(pH8.0)由50mM Tris-HCl (pH8.0)、0.1% Triton X-100、氯化鈉組成,用于清洗免疫親和層析的柱子。
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