本生課堂：熒光定量PCR(qPCR)檢測(cè)服務(wù)(含內(nèi)參)

　　一、服務(wù)概述

　　實(shí)時(shí)熒光定量PCR(Real Time PCR)技術(shù)，是指在PCR指數(shù)擴(kuò)增期間通過(guò)連續(xù)監(jiān)測(cè)熒光信號(hào)強(qiáng)弱的變化來(lái)即時(shí)測(cè)定特異性產(chǎn)物的量，最后通過(guò)標(biāo)準(zhǔn)曲線對(duì)未知模板進(jìn)行定量分析的方法。熒光定量PCR的熒光檢出方法包括SYBR green(熒光染料摻入法) 和Taqman probe (探針?lè)?兩種方法。

　　二、服務(wù)內(nèi)容

　　1.從動(dòng)物細(xì)胞、人或動(dòng)物組織等樣品中提取核酸;

　　2.對(duì)核酸進(jìn)行濃度及純度分析;

　　3.熒光定量PCR檢測(cè);

　　(1)引物和探針的設(shè)計(jì)與合成;

　　(2)絕對(duì)定量和相對(duì)定量的選擇;

　　(3)探針?lè)ê腿玖戏ǖ倪x擇;

　　(4)熒光定量PCR儀對(duì)目的基因的檢測(cè);

　　(5)數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)和分析;

　　4.預(yù)實(shí)驗(yàn)服務(wù)：根據(jù)客戶提供的目的基因序列或NCBI序列號(hào)提供客戶引物和探針，并篩選出化的引物和探針;

　　5.正式實(shí)驗(yàn)服務(wù)：根據(jù)預(yù)實(shí)驗(yàn)篩選的引物和探針對(duì)所用樣品進(jìn)行熒光定量PCR的檢測(cè)，并對(duì)結(jié)果進(jìn)行統(tǒng)計(jì)和分析。

　　三、樣品要求

　　細(xì)胞>1×106個(gè);組織>50mg;細(xì)菌濕重>50mg

　　項(xiàng)目服務(wù) 內(nèi)容 周期(工作日)

　　抽提樣品DNA或RNA 細(xì)胞樣品 5

　　組織樣品 5

　　引物設(shè)計(jì)與合成 優(yōu)化引物&探針設(shè)計(jì)及合成 7

　　優(yōu)化引物設(shè)計(jì)及合成 5

　　引物合成 3

　　RT反應(yīng) mRNA反轉(zhuǎn)錄成cDNA 5

　　標(biāo)準(zhǔn)曲線制作 相對(duì)定量(雙標(biāo)準(zhǔn)曲線法) 5

　　絕對(duì)定量

　　熒光PCR檢測(cè) 基因 10

　　四、客戶需提供

　　1.請(qǐng)?zhí)峁┬迈r材料或直接提供已純化的DNA/RNA，確保總量>5μg/樣品。如果目的基因表達(dá)量較低時(shí)，應(yīng)盡量提供更高濃度的總RNA或DNA;

　　2.請(qǐng)?zhí)峁┮阎娜L(zhǎng)基因序列(GeneBank Accession Number、Gene ID);

　　3.請(qǐng)?zhí)峁┍M可能詳細(xì)的背景資料：生物物種信息(Human、Mouse、Rat等)、DNA/RNA來(lái)源、豐度等;

　　4.客戶可以提供引物，沒(méi)有引物的情況下，本公司幫助設(shè)計(jì)合成。

　　五、BUSNEN本生提供

　　1.RNA抽提和PCR擴(kuò)增電泳結(jié)果的數(shù)碼拍照，定量PCR實(shí)驗(yàn)結(jié)果原始文件及相關(guān)軟件;

　　2.提供實(shí)驗(yàn)報(bào)告，包括實(shí)驗(yàn)方法、步驟、所用試劑、儀器、數(shù)碼照片及相關(guān)分析數(shù)據(jù)等，如有必要可以協(xié)助客戶進(jìn)行相關(guān)的數(shù)據(jù)處理和分析。

　　抗體本生一直視質(zhì)量控制為企業(yè)的生命，追求企業(yè)競(jìng)爭(zhēng)力的不斷提升。公司在經(jīng)營(yíng)中始終秉承：遵紀(jì)守法，嚴(yán)于律己，寬仁以待，敢于承擔(dān)的企業(yè)精神作為標(biāo)準(zhǔn)，以過(guò)硬的質(zhì)量和優(yōu)良的服務(wù)來(lái)維護(hù)和拓展市場(chǎng)，較大限度的滿足客戶的需求。與客戶的共贏，是我們的發(fā)展目標(biāo)。本生!您信任的合作伙伴。我們?cè)概c您真誠(chéng)合作，共創(chuàng)美好的未來(lái)。