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如何防止細胞培養(yǎng)瓶被污染?
細胞培養(yǎng)瓶一般蓋子都是封閉的,不帶內(nèi)墊,常用于密閉培養(yǎng),可保證其密閉性;進口的培養(yǎng)瓶的蓋子樣式比較多:密閉蓋、聚酯蓋、透氣蓋、隔墊蓋等。密閉蓋的性能和國產(chǎn)的是相同的,聚酯蓋常用于開放培養(yǎng),只需輕輕旋松瓶蓋便可保證瓶內(nèi)氣體與環(huán)境中氣體的交換。細胞培養(yǎng)實驗所需的物品、器材應進行嚴格的滅菌或購買無菌的一次性物品。玻璃瓶可擰松瓶蓋滅菌(指高壓蒸汽滅菌,以下同)或用鋁箔紙包住瓶口,和瓶蓋分別滅菌。其它玻璃和金屬器材用鋁箔紙包裹進行滅菌。
細胞培養(yǎng)瓶由硼硅酸鹽玻璃制成,用于細胞的高效培養(yǎng)。產(chǎn)品尺寸緊密、透光性好、表面光滑、無瑕疵,而其寬口徑的瓶口設計方便了細胞的存取和瓶壁的清洗。那么,你們知道細胞培養(yǎng)瓶污染如何防止嗎?
1,從培養(yǎng)箱取放細胞前,用酒精清潔雙手(或手套),盡量縮短開門時間和減少開門次數(shù)。培養(yǎng)瓶放入培養(yǎng)箱前,用酒精消毒表面,并稍等至酒精揮發(fā)后再放入,以免培養(yǎng)箱內(nèi)滯留過多乙醇蒸氣。
2,操作的時候護服、kouzhao、手套缺一不可。操作前,準備好所有實驗所需物品,以減少走動,物品需有序擺放在超凈臺觸手可及的地方,同時空留足夠操作空間。
3,操作時,試劑不用盡量及時蓋上蓋子,移至操作區(qū)外圍,盡量不要從開口容器上經(jīng)過。
4,使用移液槍時,將容器傾斜以便于移液,切勿將槍桿碰觸瓶口及內(nèi)壁。一旦發(fā)生倒吸情況,要及時用酒精棉球擦拭,以免液體殘留導致細菌滋生。
5,先取試劑、耗材,再取移液槍、安裝頭。很多人習慣先安裝頭,然后去拿試劑、耗材,殊不知無意間槍頭已經(jīng)觸碰其他地方導致污染。
6,向廢液缸打廢液時,需輕柔,以免造成水花四濺,污染槍頭、槍體。實驗結(jié)束,及時倒掉廢液缸垃圾,沖洗之后噴灑酒精,放入超凈臺紫外照射殺菌。
7,凍存細胞時凍存管蓋子需擰緊。復蘇細胞時,從液氮罐取出凍存管,輕擰蓋子,以確認蓋子是否擰緊。鑷子夾住凍存管蓋子與管體交界處,在37度水浴鍋中快速解凍,水面不可超過凍存管蓋沿;不建議直接扔進水中,以免水滲入造成污染。
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