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本生分享—ELISA試劑盒靈敏度低原因解析
ELISA試劑盒實驗結(jié)束后,反映陽性對照、質(zhì)控在內(nèi)的所有板孔顏色均較淡。這是什么原因造成的?天津本生技術(shù)分析如下:
1. 試劑盒必須在有效期內(nèi)使用, 超過有效期的產(chǎn)品可能會產(chǎn)生很弱的信號;
2. 試劑盒沒有按規(guī)定進行保存,受高溫影響;
3. 試劑、樣品用未平衡至室溫;
4. 加入試劑的體積和時間有誤, 移液器計量不準,吸嘴內(nèi)水分太多或不清潔;
5. 洗板及加樣過程中,酶標受污染失活而失去催化顯色劑顯色的能力;
6. 孵育時間及孵育溫度未達到要求 ,反應(yīng)板放入培養(yǎng)箱時注意溫度并及時調(diào)整;
7. 洗板次數(shù)過多,或濃縮洗液稀釋倍數(shù)不符合要求;洗滌沖擊力太大。浸泡時間太長;
8. 顯色劑加量不足或順序顛倒,或混合后加入;
9. 底物作用時間不夠;
10. 蒸餾水水質(zhì)有問題;
>>實驗檢查試劑的組分及批號,確認試劑未過期。不要將試劑盒長時間置于常溫下,按使用規(guī)定儲藏。
>>確定所使用的試劑體積正確,加入時間適當。校正移液器,移液器與吸嘴配合要緊密吻合。移液不宜太快,排放應(yīng)*。
>>確認盛酶標的容器不含酶抑制劑如疊氮鈉等,確認配制洗液的容器已洗干凈,確認配制洗液的純化水達到要求且未受污染。
>>孵育溫度應(yīng)控制在37-38℃,孵育時間嚴格按照說明書操作。保溫期內(nèi)不宜多開門,以免影響保溫。
>>嚴格按說明書要求稀釋濃縮洗液及洗板,減小洗滌沖擊力,按說明書要求置留洗滌液時間和洗滌次數(shù)。
>>顯色劑滴瓶垂直向下,持力均勻,滴速不宜過快,先加顯色劑 A,后加顯色劑B,不可將A、B液混合后加入準確定時間。
ELISA試劑盒 本生一直視質(zhì)量控制為企業(yè)的生命,追求企業(yè)競爭力的不斷提升。公司在經(jīng)營中始終秉承:遵紀守法,嚴于律己,寬仁以待,敢于承擔的企業(yè)精神作為標準,以過硬的質(zhì)量和優(yōu)良的服務(wù)來維護和拓展市場,較大限度的滿足客戶的需求。與客戶的共贏,是我們的發(fā)展目標。本生!您信任的合作伙伴。我們愿與您真誠合作,共創(chuàng)美好的未來。
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