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細(xì)胞培養(yǎng)瓶的特點、選擇及細(xì)胞時有哪些注意事項!
一般實驗室在使用細(xì)胞搖瓶來培養(yǎng)細(xì)胞時總會遇到各種各樣的問題,BUSNEN本生今天跟大家分享一下我們在使用細(xì)胞搖瓶培養(yǎng)細(xì)胞時的注意事項及如何來選擇細(xì)胞培養(yǎng)瓶。
懸浮細(xì)胞常規(guī)推薦接種密度:3-5×105cell/mL,生長到2×106cell/mL左右可繼續(xù)傳代;該密度建議為理論值,實際按照每個細(xì)胞特性有波動;培養(yǎng)懸浮細(xì)胞需要穩(wěn)定的生長環(huán)境,少操作,少觀察,更有利于細(xì)胞生長;
不建議將聚團(tuán)的細(xì)胞頻繁吹散,等待密度高和狀態(tài)改善時,細(xì)胞會自行散開;部分細(xì)胞聚團(tuán)生長為特性,吹散不利于生長,請注意查看相關(guān)培養(yǎng)說明;有些細(xì)胞本身就是聚團(tuán)生長(NK92,NK92MI,JURKAT,H209,ATT20等),有些細(xì)胞本身就形態(tài)不圓(H9等),為正常現(xiàn)象,無需特殊處理;
豎瓶培養(yǎng)可以促進(jìn)細(xì)胞生長,但由于拿出來觀察時都是橫瓶,觀察久了細(xì)胞會貼到底部,觀察完再次豎起來就會有細(xì)胞掛在瓶底部,而細(xì)胞沒有培養(yǎng)基滋潤很快就會死掉并殘留在壁上,從而導(dǎo)致養(yǎng)著養(yǎng)著細(xì)胞越來越少,貼壁細(xì)胞越來越多;因此,在培養(yǎng)瓶豎置操作時需注意吹下細(xì)胞搖瓶底部的細(xì)胞,避免細(xì)胞殘留。
作為一種應(yīng)用廣泛的細(xì)胞培養(yǎng)容器,它有哪些特點,我們又該如何選擇呢?
首先,細(xì)胞培養(yǎng)瓶由聚苯乙烯原料制成,具有很好的透明度,方便透過瓶體觀察細(xì)胞的生長狀況。
其次,這種耗材有TC處理和未TC處理兩種表面,分別適用于貼壁細(xì)胞和懸浮細(xì)胞的培養(yǎng)。
第三,瓶子采用寬瓶頸設(shè)計,接觸無sijiao,方便移液管和細(xì)胞刮刀的進(jìn)入。
第四,瓶子底部留有透氣孔,有利于培養(yǎng)箱內(nèi)部氣體快速進(jìn)入細(xì)胞瓶周圍,縮短細(xì)胞瓶從常溫環(huán)境移入的回溫時間。
第五,蓋子有透氣蓋和密封蓋兩種類型,密封蓋適用于密封條件下的細(xì)胞和組織培養(yǎng),透氣蓋則適用于開放的培養(yǎng)條件,瓶蓋透氣膜疏水化設(shè)計,與液體接觸后不影響透氣膜的密封性和透氣效果。
在選擇細(xì)胞培養(yǎng)瓶的時候我們要搞清楚細(xì)胞的種類及培養(yǎng)環(huán)境,根據(jù)這兩點來確定是選擇TC處理表面還是未TC處理表面,以及透氣蓋還是密封蓋。最后,根據(jù)細(xì)胞培養(yǎng)規(guī)模確定瓶子的規(guī)格。
細(xì)胞培養(yǎng)瓶 本生一直視質(zhì)量控制為企業(yè)的生命,追求企業(yè)競爭力的不斷提升。公司在經(jīng)營中始終秉承:遵紀(jì)守法,嚴(yán)于律己,寬仁以待,敢于承擔(dān)的企業(yè)精神作為標(biāo)準(zhǔn),以過硬的質(zhì)量和優(yōu)良的服務(wù)來維護(hù)和拓展市場,較大限度的滿足客戶的需求。與客戶的共贏,是我們的發(fā)展目標(biāo)。本生!您信任的合作伙伴。我們愿與您真誠合作,共創(chuàng)美好的未來。
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