實驗中微孔板使用常見到的一些問題匯總

　　Q1：如何選擇微孔板的顏色?

　　1)熒光檢測

　　黑色微孔板能吸收光，因此可抑制自發(fā)熒光的影響，適用于 GFP、熒光素、Cy3 和 Cy5 等 短半衰期(納秒～微秒)熒光檢測。對于使用半衰期較長(微秒~毫秒)的鑭系元素螯合物 等的檢測，可使用時間分辨熒光檢測法來避免自發(fā)熒光影響，通常推薦使用白色微孔板， 但如果檢測中存在較大的交叉干擾，則需要使用黑色微孔板。

　　2)發(fā)光檢測

　　通常使用光反射效率較高的白色微孔板。如需避免交叉干擾，可使用灰白色 、灰色或黑色 微孔板。此外，磷光(指微孔板等物質受到熒光燈等光的照射后蓄存發(fā)光的現(xiàn)象)也是造 成背景增強的原因之一。黑色微孔板可抑制這種現(xiàn)象帶來的影響。對于白色微孔板，在檢 測前將其遮光約 10 分鐘以達到暗適應，即可降低磷光影響。

　　Q2：關于邊緣效應的問題

　　關于邊緣效應的類型與解決方案的信息如下：

　　①溫度梯度：可通過在測定前將微孔板的溫度預先調整為與檢測儀相同的溫度來解決。

　?、谡舭l(fā)：可使用板蓋或密封膜來防止蒸發(fā)。此外，將培養(yǎng)箱內的濕度設到 100%附近也有幫 助。

　　③針對細胞實驗中出現(xiàn)的邊緣效應，有報告稱在將微孔板放入 37℃的培養(yǎng)箱前，先將微孔 板置于室溫下預孵育 1 小時可有助于細胞均勻粘附。

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